国产欧美一区二区日韩-国产成人看片一区二三区-久久精品在线观看免费-欧美激情免费在线视频

一、標(biāo)準(zhǔn)品的制備
標(biāo)準(zhǔn)品的制備是非常復(fù)雜的問題，也是標(biāo)記免疫分析中比較難于制備的一個成分。以下討論的是實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)品(或商品化試劑中標(biāo)準(zhǔn)品)的制備。

（1）基質(zhì)的制備：如前所述，作為標(biāo)準(zhǔn)品的介質(zhì)(基質(zhì))成分應(yīng)與被測樣品相同。對大多數(shù)用于測定血清中某物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品，應(yīng)用不含被測物質(zhì)的零血清制備，以求反應(yīng)的介質(zhì)環(huán)境相當(dāng)。但有時零值血清的制備十分困難，所以有些標(biāo)準(zhǔn)品用適當(dāng)?shù)木彌_液制備，并在緩沖液中加入一定量的載體蛋白(一般用1%～2%的牛血清白蛋白)，以便使其與樣品的介質(zhì)環(huán)境相近。

零值血清的制備方法有：
A、吸附法：血清中小分子物質(zhì)如三碘甲狀腺原氨酸 (T3)、甲狀腺素(T4)等，可用活性炭吸附去除。這種方法簡便，但待測物質(zhì)難以清除干凈，而且大分子活性物質(zhì)不能用此法進(jìn)行制備。
B、反復(fù)凍融法：對大分子活性物質(zhì)可選用低值血清，經(jīng)反復(fù)凍融使被測物質(zhì)失活。用這種方法可使某些蛋白類激素大部分失活，但也難以得到真正的零值血清。
C、親和層析法：用特異性抗體制備親和層析柱，用以吸附被測抗原。用這種方法可以得到高質(zhì)量的零值血清，但本法比較復(fù)雜而且成本也高。

（2）標(biāo)準(zhǔn)物純品的選擇：應(yīng)選擇高化學(xué)純和高免疫純的純品作標(biāo)準(zhǔn)品。其中免疫純尤為重要，在標(biāo)準(zhǔn)品中不應(yīng)含有與被測物質(zhì)有交叉反應(yīng)的物質(zhì)。
（3）標(biāo)準(zhǔn)品的制備：先用零值血清配置高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，然后根據(jù)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的要求，用零值血清將高值血清稀釋至應(yīng)有的濃度，制成符合預(yù)定要求的，由不同濃度組成的系列標(biāo)準(zhǔn)品。

二、標(biāo)準(zhǔn)品的鑒定

（1）免疫活性的鑒定：選用高特異性的抗血清分別作公ren標(biāo)準(zhǔn)品(如WHO的國際參考品或國家標(biāo)準(zhǔn)品)的待鑒定標(biāo)準(zhǔn)品的劑量反應(yīng)曲線，并觀察兩條曲線的平行性。如兩條劑量反應(yīng)曲線平行，說明兩種物質(zhì)對同一抗體有相同的親和力，即二者是同質(zhì)性物質(zhì)。如兩條劑量反應(yīng)曲線不平行，說明兩種物質(zhì)具有異質(zhì)性，因而這一待鑒定的標(biāo)準(zhǔn)品是不能使用的。

（2）濃度的標(biāo)定：用已鑒定過的，免疫活性合格的標(biāo)準(zhǔn)品，與公ren的標(biāo)準(zhǔn)品作濃度相同的劑量反應(yīng)曲線。此時，兩條劑量反應(yīng)曲線應(yīng)該是基本重合的。如果兩者平行但不重合，則取兩條劑量反應(yīng)曲線的50%結(jié)合處的相應(yīng)劑量( ED50 )計算二者的換算系數(shù)，然后調(diào)整待鑒定標(biāo)準(zhǔn)品的濃度，直至使兩條劑量反應(yīng)曲線wan全或基本重合為止。

三、標(biāo)準(zhǔn)品的計量

許多小分子抗原或半抗原已能得到純品或進(jìn)行合成，它們對作為標(biāo)準(zhǔn)品的要求可以得到基本的滿足，其計量多直接用單位體積中的重量表示，如mg / ml、ng / ml 、pg / ml等。最近WHO推薦用質(zhì)量單位取代重量單位，即mol / L、mmol / L、或nmol / L等。對大分子的活性物質(zhì)則比較復(fù)雜。由于得不到絕對的純品，故很難直接用單位體積中的重量或單位體積中的質(zhì)量計量。因此，常用該物質(zhì)的生物活性單位表示，如IU / L、mIU / L等。