生化試劑問(wèn)題
1.M與mol/l的換算關(guān)系?
M即mol/l,mM即mmol/l,μM即μmol/l,nM即nmol/l,pM即pmol/l,fM即fmol/l。 1M=103mM=106μM=109nM=1012pM=1015fM
2. 凍存試劑或樣品可以室溫或37℃水浴解凍嗎?
凍存試劑或樣品的解凍,如果時(shí)間比較充裕,建議在冰浴或冰水浴上緩慢解凍。如果時(shí)間比較著急,大多數(shù)凍存的試劑或樣品是可 以在室溫或37℃水浴解凍(例如抗生素一些產(chǎn)品不建議客戶37度水浴),但都必須特別小心,必須邊觀察、邊輕輕晃動(dòng)、邊融解。待 部分溶解后即需從水浴中取出,確保溶解過(guò)程中試劑或樣品還是接近0℃的。如果該試劑或樣品在0℃不會(huì)結(jié)凍,解凍后可以置于冰浴或冰水浴。
3. 離心力(×g)和每分鐘轉(zhuǎn)速(rpm)如何換算?
轉(zhuǎn)速有離心力(×g)和每分鐘轉(zhuǎn)速(rpm)兩種表示方式,有些離心機(jī)設(shè)置有rpm和xg顯示,但普通離心機(jī)沒(méi)有自動(dòng)切換功能。需要用下面的公式進(jìn)行換算: g=r×11.18×10-6×rpm2 (r 為有效離心半徑,即從離心機(jī)軸心到樣品中心位置的長(zhǎng)度,單位為厘米) 例如: 轉(zhuǎn)速為3000rpm,有效離心半徑為10 cm, 則離心力=10×11.18×10-6×30002=1006.2(×g)。
4. 微量液體試劑如何量取?
(1)在開啟裝有微量試劑的離心管之前,宜先適當(dāng)離心(500-2000rpm離心5秒即可)。這一步很重要,目的是將因運(yùn)輸顛倒而粘于管壁和蓋子上的試劑收集至管底以供使用。
(2)微量液體樣品宜盡量減少量取次數(shù),以減少不必要的損耗。每多量取一次會(huì)損耗0.5-數(shù)微升不等的試劑,例如總體積為100μl的試劑,每次量取5μl,通常不太可能量取20次的。
(3)事先計(jì)算好樣本數(shù)量和試劑使用量,一次性量取配制出一定量的工作液后,再分裝至各反應(yīng)管之中。這樣可以減少試劑量取的次數(shù)。
(4)最好使用經(jīng)校驗(yàn)的、精密度高、合適量程的微管移液 槍及槍頭,否則會(huì)有超乎想像的誤差和損耗。如果是連續(xù)量取,每次量取都宜更換槍頭,否則會(huì)導(dǎo)致第一次吸取后每次的吸取體積明顯偏大。
(5)移液槍吸取操作時(shí),宜垂直進(jìn)入液面數(shù)毫米。槍頭通常不宜直接插入管底,略低于液面即可,避免試劑過(guò)多粘于槍頭造成損耗。慢吸,緩慢松開控制按鈕,否則液體進(jìn)入吸頭過(guò)速會(huì)導(dǎo)致少量 液體倒吸入移液器內(nèi)部,導(dǎo)致最終打出時(shí)的體積減少。 (6)打出液體時(shí)槍頭貼壁并有一定角度,慢放,即緩慢打出液體。
5. 微量對(duì)于微量粉末試劑如何操作及使用?
(1)在開啟裝有微量試劑的離心管之前,宜先適當(dāng)離心(500-2000rpm離心5秒即可)。這一步很重要,目的是將因運(yùn)輸顛倒而粘于管壁和蓋子上的試劑收集至管底以供使用。
(2)對(duì)于10mg或以下的微量固體樣品,通常不建議再使用天平進(jìn)行稱量,而宜直接按照產(chǎn)品標(biāo)簽上標(biāo)示的量進(jìn)行溶液的配制。例如5mg的粉末試劑,很多時(shí)候很難從離心管中全部取出來(lái)的,但可以 在該離心管內(nèi)全部配制成適當(dāng)?shù)娜芤?。?duì)于量略多一些的微量粉末樣品,也宜盡量減少稱量次數(shù),通常建議每次稱量的重量不少于10mg。多次微量的稱量可能會(huì)由于稱量誤差導(dǎo)致每次的檢測(cè)結(jié)果 產(chǎn)生偏差。對(duì)于微量的粉末,如果不涉及溶液保存的穩(wěn)定性方面的問(wèn)題,通常建議一次性將所有的粉末試劑按標(biāo)注的劑量配制完畢。
(3)如果需要稱量,請(qǐng)注意使用靈敏度較高的分析天平,使用前進(jìn)行校準(zhǔn)。另外,稱量時(shí)不建議帶乳膠手套(可以戴一次性薄膜手套),以防止乳膠手套和稱量紙之間產(chǎn)生的靜電影響稱量的準(zhǔn)確性。 稱量20-30mg或更小重量時(shí),不可以戴乳膠手套。我們測(cè)試過(guò)的多種乳膠手套(包括某些品牌的進(jìn)口乳膠手套),在用乳膠手套接觸(摩擦)稱量紙后會(huì)產(chǎn)生靜電,從而會(huì)影響稱量的準(zhǔn)確性,誤差可以 達(dá)到數(shù)毫克。而使用聚乙x材質(zhì)的薄膜手套,即所謂的PE薄膜手套(類似于保鮮膜材質(zhì)),接觸稱量紙則不會(huì)產(chǎn)生靜電,此時(shí)誤差較小。
6. 試劑或試劑盒存放時(shí)搞錯(cuò)保存溫度,是否會(huì)影響其使用效果或是否能繼續(xù)使用?
對(duì)于很多試劑雖然要求低溫保存,但這是長(zhǎng)期保存的條件,很多時(shí)候是可以在4℃甚至室溫短時(shí)間保存的。對(duì)于具體的某種試劑或試劑盒是否可以繼續(xù)使用,請(qǐng)?jiān)O(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品 或陽(yáng)性對(duì)照進(jìn)行檢測(cè),如果標(biāo)準(zhǔn)品或陽(yáng)性對(duì)照的檢測(cè)結(jié)果正常即可繼續(xù)使用。
7. 試劑已經(jīng)變色是否還能用?
不能用。試劑變色通常由于試劑的不穩(wěn)定引起,變色很多時(shí)候表明試劑已經(jīng)變質(zhì)。對(duì)于需要低溫或避光保存的試劑一定要低溫或避光保存。
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